30%二嗪磷微囊悬浮剂高效液相色谱分析

二嗪磷是一种高效、广谱的有机磷杀虫杀螨剂，对鳞翅目、半翅目等多种害虫均有较好的防治效果，主要登记用于防治水稻、棉花、果树、蔬菜、甘蔗、玉米、烟草、马铃薯等作物的各种刺吸式口器害虫和食叶害虫。二嗪磷的残留分析及颗粒剂含量分析方法已有报道，但有关二嗪磷微囊悬浮剂的分析方法，目前尚未见公开报道。本文采用高效液相色谱技术建立了30%二嗪磷微囊悬浮剂的分析方法，以期为该产品质量控制提供技术支撑。

1 材料与方法

1.1 主要仪器

Agilent 1260型高效液相色谱仪配紫外检测器、自动进样器及Agilent色谱工作站（安捷伦科技有限公司）；岛津UV-1800型紫外可见分光光度计（岛津公司）；GD410DP型超声波清洗器（深圳市光点超声波设备有限公司）。

1.2 试剂

二嗪磷标准品（质量分数98.4%，北京宇悦生物科技有限公司）；甲醇（色谱纯）；水：新蒸二次蒸馏水；30%二嗪磷微囊悬浮剂（北京宇悦生物科技有限公司）。

1.3 液相色谱条件

Agilent 1260型高效液相色谱仪，具有紫外检测器和自动进样器；色谱柱：WondaSil C₁₈-WR（150mm ×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇＋水（体积比80∶20）；流速：1.0mL/min；柱温：室温；检测波长：254nm；进样体积：5μL。采用外标法定量。在该色谱条件下，二嗪磷的保留时间约为5.8min。二嗪磷标样及样品的典型液相色谱图见图1、图2。

1.4 测定步骤

1.4.1 标准溶液的配制

准确称取二嗪磷标准品0.05g (精确至0.0002g)，置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，超声溶解，备用。

1.4.2 试样溶液的配制

准确称取30%二嗪磷微囊悬浮剂样品0.17g (精确至0.0002g)，置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，超声溶解后，过0.45μm有机滤膜，备用。

1.4.3 测定

按1.3色谱条件，连续注入数针标样溶液，待相邻2针的相对响应值变化小于1.5%时，依标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进样测定。

1.4.4 计算

将测得的2针试样溶液及其前后2针标样溶液中二嗪磷峰面积分别进行平均。试样中二嗪磷的质量分数w (%)按下式计算。

式中：A₁为标样溶液中二嗪磷峰面积的平均值，mAU·s；A₂为试样溶液中二嗪磷峰面积的平均值，mAU·s；m1为二嗪磷标样的质量，g；m₂为试样的质量，g；P为标样中二嗪磷的质量分数，%。

2 结果与分析

2.1 色谱条件的选择

2.1.1 流动相的选择

分别试用不同比例的甲醇+水、乙腈+水作为流动相对试样进行分离检测，结果发现选用乙腈和水作为流动相出峰时间长且峰型不对称。当选用甲醇和水作为流动相且体积比为 80∶20时，峰形对称，分离效果理想，出峰时间适中，故最终选定流动相为甲醇+水，二者的体积比为 80∶20。

2.1.2 检测波长的选择

通过紫外可见分光光度计UV-1800在240~400nm进行紫外扫描，二嗪磷在247nm处有******吸收。考虑溶剂、助剂对吸收的影响，最终选定以254nm为检测波长（图3）。

2.2 特异性的测定

本试验方法采用全波长紫外扫描检测峰纯度分析法来鉴别。二嗪磷最小峰纯度相似度为1.000000，最小峰纯度阈值为0.999625，最小峰纯度指数为正值，说明样品色谱峰中不含有杂质。标样液相色谱峰与试样液相色谱峰出峰时间差在 1.0%以内，如图1和图 2 所示。制剂中峰纯度色谱图如图 4 所示。

2.3 分析方法的线性相关性测定

按1.4.1在1.3色谱条件下进样，每个质量浓度重复进样2次，求其峰面积平均值。以质量浓度为横坐标，峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线。二嗪磷线性方程为 y=5206.7x+1519.3，相关系数为（R²）0.999 8。二嗪磷线性关系图见图5。

2.4 分析方法的精密度测定

选取有代表性的30%二嗪磷微囊悬浮剂试样，在上述色谱操作条件下平行测定5次，结果见表1。可见，二嗪磷的标准偏差为0.18，变异系数为 0.59%。

2.5 分析方法的准确度测定

采用标准添加法，在已知质量分数的试样中，加入一定量的二嗪磷标准品，按1.3色谱操作条件进行测定，结果见表2。可见，二嗪磷的平均回收率为 99.90%，相对标准偏差为0.2542%。

2.6 非分析物干扰试验

在评价准确度时，通常包含非分析物质的干扰，因有效成分中的任何干扰物均会导致分析方法出现系统误差。分析时应同时测定不带有效成份的空白样品，或证明其无干扰。通过对溶剂（甲醇）、空白样品（不含有效成分的助剂）、原药等按1.3色谱条件进行分析，结果发现甲醇、原药及不含有效成分的助剂对分析均无明显干扰，因此使用该分析方法未受到非分析物干扰而影响测定。

3 结论

本文建立了30%二嗪磷微囊悬浮剂中有效成分的质量分析方法，此方法具有较高的准确度和精密度，线性关系良好，具有操作简便、快速、准确的优点，可适用于该产品生产过程的质量检测和控制。